تشخیص ژن های Stx با استفاده از Multiplex PCR در نمونه های بالینی

Authors

  • احمدپور, عسکری
  • ایمانی فولادی, عباسعلی
  • صدیقیان راد, حمید
  • نظریان, شهرام
Abstract:

زمینه و اهداف: تاکنون روش های مختلف تشخیصی از جمله کشت سلولی، الایزا، RFLP برای شناسایی شیگاتوکسین ها بکار رفته ولی باتوجه به داشتن هزینه زیاد، صرف زمان زیاد وداشتن حساسیت پائین کمتر مورد توجه واقع شده اند دراین تحقیق برای شناسایی ژن stx و از روش Multiplex PCR استفاده شد. مواد و روش کار: تاکنون روش های مختلف تشخیصی از جمله کشت سلولی، الایزا، RFLP برای شناسایی شیگاتوکسین ها بکار رفته ولی باتوجه به داشتن هزینه زیاد، صرف زمان زیاد و داشتن حساسیت پائین کمتر مورد توجه واقع شده اند دراین تحقیق برای شناسایی ژن stx و از روش Multiplex PCR استفاده شد. یافته‌ها: هر جفت پرایمر به طور اختصاصی برای ژن های مورد نظر عمل نموده و قطعات مورد نظر از PCR بدست آمد. ازبین سویه های مثبت 13 سویه حاوی ژن Stx2،4 سویه حاوی ژن Stx1 و 4 سویه حاوی Stx1و Stx2 بوده است. در ژنوم تخلیص شده از دیگر باکتری های گرم منفی تکثیری مربوط به قطعات این توکسین صورت نگرفت. تعیین توالی انجام شده صحت قطعات تکثیر شده رامورد تائید قرار داد. حساسیت واکنش برای شناسایی ژن Stx1،56/1 پیکوگرم در ماکرولیتر وStx2، 08/1 پیکوگرم در ماکرولیتربود. سویه های مثبت همگی به پادزیست های سفکسیم، جنتامایسین، آمیکاسین، سفتریاکسون، نیتروفورانتین حساس بودند. نتیجه‌گیری: این روش یکی از روش های سریع و دقیق برای تشخیص انواع شیگاتوکسین ها می باشد و می توان ازآن درجهت شناسایی ژن های باکتری های تولید کننده شیگا توکسین استفاده نمود.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

تشخیص ژن های stx با استفاده از multiplex pcr در نمونه های بالینی

زمینه و اهداف: تاکنون روش های مختلف تشخیصی از جمله کشت سلولی، الایزا، rflp برای شناسایی شیگاتوکسین ها بکار رفته ولی باتوجه به داشتن هزینه زیاد، صرف زمان زیاد وداشتن حساسیت پائین کمتر مورد توجه واقع شده اند دراین تحقیق برای شناسایی ژن stx و از روش multiplex pcr استفاده شد. مواد و روش کار: تاکنون روش های مختلف تشخیصی از جمله کشت سلولی، الایزا، rflp برای شناسایی شیگاتوکسین ها بکار رفته ولی باتوجه ...

full text

تشخیص ژن Stx1 درشیگلا دیسانتریه جدا شده از نمونه های بالینی در استان مازندران با استفاده ازتکنیک PCR-ELISA

هدف: در میان باکتریهای خانواده آنتروباکتریاسه، شیگلا دیسانتریه بدلیل تولید توکسین پروتئینی تحت عنوان شیگاتوکسین با داشتن فعالیت سیتوتوکسینی و نوروتوکسینی موجب بیماریهایی اسهال، گاستروانتریت و اختلال ا نعقاد داخل عروقی می شود که امروزه به عنوان مهمترین چالش برای سلامتی انسانها مطرح می باشند.  هر چند روشهای کلاسیک ومتداول میکروبیولوژی  برای تشخیص حساس واختصاصی می باشند اما محدودیت های خاص خود را ...

full text

شناسایی ژن های انتروتوکسین استافیلوکوکوس اورئوس با استفاده Multiplex PCR

سابقه و هدف: استافیلوکوکوس اورئوس یکی از مهمترین عوامل مسمومیت غذایی در جهان می باشد. در تحقیقات مختلف مشخص گردیده است که 18-15 درصد سویه های استافیلوکوکوس که از منابع مختلف جدا می شود قادر به تولید انتروتوکسین می باشند که فاکتور اصلی مسمومیت می باشند. هدف از تحقیق حاضر شناسایی ژنهای انتروتوکسین نظیر: (femA،see ،sed ،sec ،seg ،seb، sea) در استافیلوکوکوس اورئوس که با استفاده از روش PCR چندگانه ا...

full text

جداسازی هم زمان ژن های حدت gyrB, oprL, ETA سودوموناس آئروژینوزا جدا شده از نمونه های بالینی مراکز درمانی استان کرمان با روش PCR-Multiplex

زمینه و هدف: سودوموناس آئروژینوزا یک پاتوژن فرصت طلب و عامل عفونت های بیمارستانی و مرگ و میر به خصوص در بیماران با ضعف سیستم ایمنی می باشد و مقاومت ذاتی به مواد ضد میکروبی منجر به مشکلاتی در درمان عفونت های آن می شود. هدف از این مطالعه بررسی فراوانی ژن های حدت سودوموناس آئروژینوزا به روش Multiplex-PCR می باشد. روش بررسی: 60 نمونه سودوموناس آئروژینوزا شامل 40 نمونه از کلکسیون آزمایشگاه میکروبیول...

full text

تشخیص سریع مولکولی سالمونلا تیفی به روش PCR با استفاده از ژن invA در نمونه های مواد غذائی

مقدمه: به دلیل این که سالمونلا تیفی یک پاتوژن روده ای مهم و آلوده کننده آب و غذا می باشد، تشخیص سریع و دقیق آن در آب و مواد غذائی بسیار حائز اهمیت است. امروزه تشخیص سریع باکتری های بیماری زا با تکنیک های نوین در مواد غذایی از اهمیت زیادی برخوردار است. هدف از انجام این مطالعه جداسازی سالمونلا تیفی در مواد غذایی آلوده با روش PCR با استفاده از ژن invA بوده است. مواد و روش ها: بعد از استخراج DNA ب...

full text

آنالیز مولکولی کلاس های مختلف اینتگرون در سویه های بالینی پسودوموناس آئروژینوزا با استفاده از روش Multiplex-PCR

زمینه و هدف: حضور اینتگرون‌های کلاس I، II وIII  در پسودوموناس آئروژینوزا با مقاومت دارویی چندگانه، نگرانی‌های فراوانی را در کلینیک ایجاد کرده است. این مطالعه باهدف بررسی فراوانی اینتگرون کلاس  I، II و III در ایزوله‌های پسودوموناس آئروژینوزا انجام شد. مواد و روش‌ها: در این مطالعه توصیفی - مقطعی، 60 ایزوله پسودوموناس آئروژینوزا از آزمایشگاه میکروب‌شناسی بیمارستان حضرت رسول (ص)، تهران به دست آمد....

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 7  issue 2

pages  40- 50

publication date 2013-09

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Keywords

No Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023